三种药物对孔雀鱼的急性毒性试验

DOI:10.3969/j.issn.1004-6755.2014.05.001

摘 要：用高锰酸钾、孔雀石绿和亚甲基兰三种药物对孔雀鱼开展急性毒性试验，并记录了它们在24 h、48 h、72 h和96 h出现的中毒症状和死亡数。结果显示：三种药物的96 h LC50分别为1.27 mg/L，0.73 mg/L和273.5 mg/L；三种药物的SC分别为0.13 mg/L ，0.07 mg/L和23.75mg/L。相比较而言，亚甲基蓝是最安全和理想的治疗药物。

关键词：孔雀鱼；急性毒性；高锰酸钾；孔雀石绿；亚甲基兰

随着科学技术的发展和养殖技术的普及，人们对鱼用药物的选择和药效的研究日益深入。通过不同药物对某种鱼类的急性毒性试验[1-3]，可以检测该种鱼类对某种药物的敏感程度，从而筛选出药效较好的药物。

孔雀鱼（Poecilia reticulata）隶属于硬骨鱼纲（ Actinopterygi）、鳉形目( Cyprinodontiformes)、花鳉科也称胎鳉科( Poecilidae)、花鳉属（Poecilia）[4]。它适应性强，体形娇小，色彩艳丽，价格便宜，是卵胎生鱼类的代表品种，也是热带观赏鱼中养殖最普遍、观赏价值较高的种类之一。在孔雀鱼养殖过程中，各种疾病时有发生。本实验拟选用对观赏鱼广泛使用的高锰酸钾、孔雀石绿和亚甲基蓝开展急性毒性试验。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验鱼 从辽宁省盘锦市花鸟鱼观赏市场购买后，经过繁殖培育的马赛克孔雀鱼，试验鱼雌雄各半，雄鱼平均体长3.10 cm，体重平均210 mg；雌鱼全长平均3.42 cm，体重平均460 mg。试验前在规格为100 cm×400 cm×26 cm水族箱中生活良好，挑选其中规格基本一致的健壮个体作为试验鱼，正式试验每组用孔雀鱼10尾。

1.1.2 试验用水及容器 实验用水为晾晒2 d之后的自来水，水质指标：pH值7.2～8.0，溶氧量4.2～5.6 mg/L，水温（20±1）℃。试验容器为30 cm×15 cm×15 cm的塑料桶，每个塑料桶放入1 L药液，放养受试实验鱼10尾。

1.1.3 试验药物 孔雀石绿（分析纯晶体），高锰酸钾（分析纯），亚甲基蓝（分析纯），将准确称量的实验药物用试验用水按比例稀释成所需浓度，药液现配现用。

1.2 试验方法

为了确定孔雀鱼对药物的急性毒性反应，先按急性毒性试验方法进行预试验，确定孔雀鱼全死和不死的试验范围，再按等浓度梯度进行正式试验[5]。试验设置五个浓度组和一个对照组，另外，每组设两个重复。试验分组和浓度设置见表1。试验期间不投喂，先做8 h 的连续观察，为保证试验期间药液浓度基本一致，每12 h 更换一次药液，详细记录孔雀鱼24 h、48 h、72 h和96 h的活动和死亡情况[6]。

采用直线内插法求取其半致死浓度（LC50）。安全浓度（Safe Concentration SC）用公式[6]：安全浓度（SC）=96 h LC50×0.1。以鳃盖是否停止活动和对轻微刺激有无反应作为判断依据。用玻璃棒或小镊子轻刺尾柄部位，5 min内仍无反应的，即可确定其死亡。

表1 各种试验药物浓度

mg•L-1

组别 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ

高锰酸钾 1.0 1.8 2.6 3.4 4.2

孔雀石绿 0.7 0.9 1.1 1.3 1.5

亚甲基蓝 230 245 260 275 290

对照组 0 0 0 0 0

2 结果

2.1 高锰酸钾

试验表明：孔雀鱼对高锰酸钾的中毒反应因药液浓度不同而异。当浓度为1.0 mg/L时，观察孔雀鱼72 h 存活状态基本正常；当浓度为1.8 mg/L时，72 h 有3尾死亡。96 h 死亡率70%；当浓度为3.4 mg/L时，24 h 有2尾试验鱼死亡，48 h死亡率70%；当浓度为4.2 mg/L以上时，24 h 死亡率60%。对照组试验鱼生活正常。

肉眼观察死亡鱼体为透明的黄色，尾柄弯曲，眼球黑而大，非常突出于头部。解剖观察鱼体：头部鳃丝充血，有红褐色沉积。胆囊绿色、肿大为正常的几倍。孔雀鱼在不同浓度条件下的急性毒性试验结果见表2。

表2 高锰酸钾急性毒性试验结果

分组 浓度/

mg•L-1 死亡数/尾

24 h48 h 72 h 96 h

96 h LC50

/mg•L-1SC/

mg•L-1

高锰酸钾

对照组

1.0 0 0 0 4

1.8 0 0 3 7

2.6 0 3 8 10

3.4 2 7 10 10

4.2 6 10 10 10

0 0 0 0 0

1.270.13

2.2 孔雀石绿

浓度为0.7 mg/L试验组中，试验鱼72 h 无死亡出现；浓度0.9 mg/L试验组中，试验鱼48 h 内死亡7尾，其余个体尾柄弯曲，活力减弱；浓度为1.1 mg/L的试验鱼，24 h 死亡1尾，48 h 死亡率达100% ；在1.3 mg/L试验组中，24 h 死亡率60%，48 h 死亡率100%；在1.5 mg/L试验组中，12 h 死亡率60%， 24 h 死亡率100%。对照组试验鱼存活正常。

中毒症状：尾柄弯曲，鱼体做大幅度的摇摆游动，死亡前同浮头症状，最后沉到水底死亡。各鳍基部附着深绿色孔雀石绿，眼球黑而大，非常突出于头部。孔雀鱼在不同孔雀石绿浓度下的试验结果见表3。

表3 孔雀石绿急性毒性试验结果

分组 浓度/

mg•L-1 死亡数/尾

24 h48 h 72 h 96 h

96 h LC50

/mg•L-1SC/

mg•L-1

孔雀石绿

对照组

0.7 0 0 0 4

0.9 0 7 10 10

1.1 1 10 10 10

1.3 6 10 10 10

1.510 10 10 10

0 0 0 0 0

0.730.07

2.3 亚甲基蓝

浓度230 mg/L和245 mg/L时，48 h 内都无死鱼出现；当溶液浓度为260 mg/L时，24 h 无死鱼出现；浓度275 mg/L时，24 h 试验鱼出现死亡或浮头症状，48 h 死亡率为100%；浓度290 mg/L时，48 h 死亡率为100%。对照组试验鱼存活正常。

中毒症状：鱼体似缺氧到水表面呼吸，受惊不下沉，碰触时下沉。死亡时体表附着深蓝色，眼球黑而大，非常突出于头部。孔雀鱼对不同浓度亚甲基蓝的试验结果见表4。

表4 亚甲基蓝急性毒性试验结果

分组 浓度/

mg•L-1 死亡数/尾

24 h48 h 72 h 96 h

96 h LC50

/mg•L-1SC/

mg•L-1

亚甲基蓝

对照组

230 0 0 0 3

245 0 0 3 7

260 0 5 10 10

275 3 10 10 10

290 8 10 10 10

0 0 0 0 0

237.523.75

3 讨论

试验结果表明：高锰酸钾、孔雀石绿、亚甲基蓝这三种药物的安全浓度分别为0.13 mg/L，007 mg/L，23.75 mg/L。所以，这三种药物相比较，孔雀鱼对亚甲基蓝的耐受力最强，最适合对孔雀鱼疾病的防与治，高锰酸钾次之，孔雀鱼对孔雀石绿最敏感。其敏感性排列次序为：孔雀石绿＞高锰酸钾＞亚甲基蓝。

孔雀石绿是渔业禁用药物之一，但对观赏鱼不涉及食品安全问题，主要用于防治观赏鱼的水霉病、烂鳃烂鳍病及寄生虫病，价格便宜且治疗效果较好。但孔雀鱼对孔雀石绿非常敏感，安全浓度仅0.07 mg/L。因此，对孔雀鱼要慎用此药。

高锰酸钾是一种外用消毒剂，在养殖渔业应用广泛，对池塘和养殖容器具有很好的消毒作用，能够有效地杀灭原生虫类和吸虫类寄生虫，对鱼病具有很好的防治效果，孔雀鱼对高锰酸钾敏感性较孔雀石绿差，在孔雀鱼的养殖中，是很好的药物消毒剂。

孔雀鱼对亚甲基蓝的敏感性最差，安全浓度为23.75 mg/L，渔业生产上治疗鱼病时0.4～05 g/m3全池泼洒，即使用0.4～0.5 mg/L亚甲基蓝就可达到治病效果。所以，在预防水霉病和小瓜虫病等方面，对孔雀鱼来说是一种非常安全和理想的治疗药物。

参考文献：

[1] 丁淑荃，万全，马艳，等.7种常规药物对鳜鱼苗的急性毒性试验[J].水利渔业，2006（2）：99-100

[2] 段彪，肖建光，叶英，等几种重金属离子对淡水石斑胚胎及仔鱼的毒性试验[J].重庆水产，2003（1）：32-34

[3] 何高明，项黄，张素华.青霉素、硫酸庆大霉素对红剑鱼、孔雀鱼的急性毒性实验[J].北京农业，2007（6）：22-24

[4] 宋憬愚编著.观赏鱼养殖—热带鱼[M]. 北京：中国农业大学出版社,2001：37-45

[5] 张海宾.5种消毒剂对锦鲤的急性毒性试验[J].水利渔业，2005.6

[6] 房英春，李越，李胜男，等.二溴海因和三氯异氰尿酸对孔雀鱼的急性毒性试验[J].水产养殖，2005（11）：38-39

Acute toxicity testing of three drugs in Guppy fish

XU Ya

--------------------------------------------------------------------------------

chao

(Economic Management Department,Panjin Vocational and Technical College,Panjin 124010,china)

Abstract：In the acute toxicity testings of three drugs in the guppy fish Poecilia reticulate,the toxicity symptom and the amount of death shows that, the 96 h half lethal dose of Potassium permanganate, Malachite green and Methylene Blue in Guppy is 1.27 mg/L, 0.73 mg/L and 273.5 mg/L respectively.Safety concentrations of the above three drugs are 0.13 mg/L,0.07 mg/L and 23.75 mg/L respectively. Thus,methylene blue is the safest among the three druds for guppy.

Key words：Guppy fish(Poecilia reticulate);acute toxicity;Potassium permanganate;Malachite green; Methylene Blue

（收稿日期：2014-01-20）