HBV感染型原发性肝癌肿瘤微环境T淋巴细胞亚群的表达

[摘要] 目的 分析HBV感染型原发性肝癌患者T淋巴细胞亚群在肿瘤微环境中的表达情况。 方法 方便收集医院2016年10月—2017年10月收治的HBV感染性原发性肝癌患者36例资料，纳入感染组，取同期收治的非HBV感染原发性肝癌患者纳入非感染组，对两组患者T淋巴细胞亚群表达在肿瘤微环境中的表达情况观察对比，并观察微血管密度MVD值情况。 结果 T淋巴细胞亚群表达情况，Treg与CD4等阳性率感染组均相对较高，CD8阳性率非感染组相对较高，组间对比差异有统计学意义（χ2=8.134，6.020， 27.023， P=0.004， 0.014， 0.000 <0.05）。肿瘤组织微环境内，感染组与非感染组MVD值分别为（66.50±9.00）、（57.80±7.50），组间对比差异有统计学意义（t=4.456，P=0.000<0.05）。 结论 T淋巴细胞亚群在HBV感染原发性肝癌患者中有较高的表达水平，且有较高的MVD值。

[关键词] 原发性肝癌；HBV感染；T淋巴细胞亚群；肿瘤微环境

[中图分类号] R5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2018）11（a）-0027-03

[Abstract] Objective To analyze the expression of T lymphocyte subsets in tumor microenvironment in patients with HBV-infected primary liver cancer. Methods Thirty-six patients with HBV-infected primary liver cancer admitted to the hospital from October 2016 to October 2017 were convenient eolled in the infection group. Non-HBV-infected primary liver cancer patients admitted to the same period were included in the non-infected group. The expression of T lymphocyte subsets in the tumor microenvironment was observed and compared， and the microvascular density MVD values were observed. Results The expression of T lymphocyte subsets， Treg and CD4 were relatively high in the infection group， and the CD8 positive rate was relatively high in the non-infected group. There was a significant difference between the groups （χ2=8.134，6.020， 27.023， P=0.004， 0.014， 0.000 <0.05）. In the microenvironment of tumor tissue， the MVD values of the infected group and the non-infected group were （66.50±9.00） and （57.80±7.50）， respectively， and there was significant difference between the groups （t=4.456， P=0.000<0.05）. Conclusion T lymphocyte subsets have higher expression levels in patients with HBV-infected primary liver cancer and have higher MVD values.

[Key words] Primary liver cancer； HBV infection； T lymphocyte subsets； Tumor microenvironment

作為临床常见恶性肿瘤疾病，原发性肝癌病情变化较快，部分研究资料中均指出受患者自身免疫耐受影响，可能出现细胞浸润、细胞增殖以及细胞转移等情况，远期生存率较低[1]。特别部分患者存在HBV感染即乙型肝炎病毒感染情况，血清炎性因子水平更高。临床诊疗中，应注意对肿瘤微环境内T淋巴细胞表达情况观察，为临床治疗提供有效指导。该次研究将以2016年10月—2017年10月收治的HBV感染性原发性肝癌患者36例为对象，对比非HBV感染患者微血管密度、T淋巴细胞亚群表达情况，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便收集收治的HBV感染性原发性肝癌患者36例资料，患者年龄49～72岁，平均（61.6±5.5）岁，根据Edmondson分级[2]，Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级分别为2例、15例、19例，其中男性与女性各19例、17例。取同期收治的非HBV感染型原发性肝癌患者36例，患者年龄50～70岁，平均（61.7±5.0）岁，根据Edmondson分级，Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级分别为1例、14例、21例，其中男性与女性均为18例。入选标准：①患者均给予病理学诊断检查，确诊原发性肝癌；②患者无危重症情况或其他影响研究配合情况；③研究经伦理委员会批准，患者及其家属知情同意。一般资料组间数据结果对比差异无统计学意义（P>0.05），可进行对比分析。

1.2 方法

对所有患者病历资料做回顾性分析，通过对穿刺活检标本、根治切除标本的收集，在流式细胞仪应用下，做T淋巴细胞的检测，若检出结果提示有Treg（调节性T细胞CD4+25+）、CD8（CD8+T淋巴细胞）、CD4（CD4+T淋巴细胞），若检测结果提示有上述细胞表达，判断为阳性。另外，借助Weidner方法，对微血管密度MVD观察。

1.3 观察指标

对两组患者T淋巴细胞亚群在肿瘤环境中的表达情况观察，同时比较微血管密度值。

1.4 统计方法

经过SPSS 21.0统计学软件进行数据处理，计量资料用（x±s）表示，计数资料用[n（%）]表示，对比分别由t检验、χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者T淋巴细胞亚群表达在肿瘤微环境中的表现观察

T淋巴细胞亚群表达情况，Treg与CD4等阳性率感染组均相对较高，CD8阳性率非感染组相对较高，组间对比差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 患者MVD情况观察比较

肿瘤组织微环境内，感染组与非感染组MVD值分别为（66.50±9.00）、（57.80±7.50），组间对比差异有统计学意义（t=4.456、P=0.000<0.05）。

3 讨论

3.1 恶性肿瘤微环境

恶性肿瘤的研究越来越深入，其中肿瘤微环境成为研究热点。肿瘤微环境时指肿瘤的发生、生长、转移与肿瘤细胞所处的内外环境关系密切，包括肿瘤所在组织结构、功能代谢，全身以及局部代谢、分泌、结构、免疫与功能改变。HBV感染是原发性肝癌的重要危险因素之一，不同于其他酒精性脂肪肝等非感染原因所致原发性肝癌，患者在发生原发性肝癌之前，患者便可能因出现HBV感染出现免疫等肿瘤微环境因素改变，从而影响肿瘤的发生，在肿瘤发生之后，HBV感染仍然发生作用，从而影响肿瘤的生长、复发、转移。与此同时，原发性HBV相关的原发性肝癌还因肿瘤、长期肝硬化，常伴有贫血、腹水等表现，组织损伤加重，进一步导致肿瘤微环境改变[3-4]。

3.2 肝癌、HBV、T淋巴细胞水平关系

T淋巴细胞来源于骨髓多能干细胞，骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞在胸腺激素的诱导下，会成为具有免疫活性的T细胞。陈幸福的T细胞会经淋巴管、外周血、组织液等进行再循环，发挥细胞免疫、免疫调节等功能，加强免疫应答，维持免疫记忆。T淋巴细胞具有抗癌作用，机体会对肿瘤细胞产生抵抗作用，T淋巴细胞能够反映肿瘤、免疫系统之间的相互作用。大量研究显示其在乳腺癌、卵巢癌等肿瘤以及外周血中都可见T淋巴细胞功能与数量异常，反映了肿瘤患者免疫功能变化，感染对象的CD4水平异常率再40%～60%之间，CD8显著下降在0%～10%之间，Treg异常率在30%～70%之间[5]。HBV感染通过激活免疫应答，影响T淋巴细胞水平，从而影响肿瘤发生、进展，肿瘤反过来会影响T淋巴细胞，反过来影响HBR感染的控制。T淋巴细胞反映了肿瘤、HBV、免疫细胞之间的关系。该次研究也证实这一点，感染HBV的对象Treg与CD4、CD8阳性率都与非感染组差异有统计学意义（P<0.05），感染对象CD4与阳性率50.00%、CD8异常率5.56%、Treg异常率44.44%，与前文报道的结果相近。

CD4细胞是一种重要的免疫细胞，主要表达于辅助T（Th）细胞，参与Th细胞TCR识别抗原的信号转导，是反应细胞。感染组对象CD4阳性率高于非感染组，提示免疫应答明显增强，这与HBV刺激CD4+T细胞有关。CD8+主要与免疫应答关系密切，可识别可溶性抗原、产生抑制因子等途径抑制免疫应答，感染组CD8+水平低于对照组（P<0.05），提示HBV感染会削弱免疫抑制作用，这可能会导致“肿瘤逃逸”，增加肿瘤增殖风险。T淋巴细胞亚群指标变化，提示HBV会影响原发肝癌患者免疫功能，进一步加重免疫功能紊乱，机体免疫监视功能降低，引起肝癌细胞发生免疫“逃逸”，出现疗效欠佳情况，提示HBV感染原发性肝癌出现疗效欠佳的风险可能更高。

3.3 微血管密度MVD

另外，该次研究中，感染组与非感染组MVD值分别为（66.50±9.00）、（57.80±7.50），组间对比差异有统计学意义（P<0.05）。之所以出现该情况，主要受新生血管影响。肿瘤转移或侵袭均以新生血管为基础，这些新生毛细血管具有较高的通透性，且管壁不完整，肿瘤细胞通过新生毛细血管更加容易，其他文献报道显示MVD存在显著的个体差异，水平在50%～80%之间，该组对象患者MVD处于较低水平，这可能与MVD不仅与感染有关，还与肿瘤分期、肿瘤大小等因素有关[7-8]。同时，毛细血管生成后，有较多基质降解酶包括纤溶酶原激活物、Ⅳ型胶原酶与内皮细胞产生，这些均会导致基质屏障被破坏，为肿瘤细胞的转移提供条件[9-10]。从该次研究结果中发现，在微血管密度值MVD值上观察比较，感染组相对较高，便能反映除原发性肝癌患者有HBV感染情况，新血管生成能力强，这可能与HBV感染相关的免疫功能紊乱有关。对于肿瘤转移情况，是否受肝癌血管生成影响，需在未来研究中进一步深入分析。

综上所述，T淋巴细胞亚群在HBV感染原发性肝癌患者中有较高的表达水平，且有较高的MVD值，之所以与非HBV感染型患者存在差異，很大程度受肿瘤血管生成、HBV异常增殖影响，应将这些诊断结果作为临床治疗的参考指导。

[参考文献]

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[2] 李婷，时代强.HBV感染型原发性肝癌肿瘤微环境T淋巴细胞亚群的表达[J].预防医学，2018，30（4）：387-388.

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[5] 李炜，柳仲秋，贺启华，等.益气解毒中药联合肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌疗效及对T淋巴细胞亚群、GP-73、GPC-3水平的影响[J].现代中西医结合杂志，2017，26（36）：4017-4020.

[6] 赵勇，魏国，胡礼冲，等.肝动脉化疗栓塞术对原发性肝癌合并HIV/AIDS患者T淋巴细胞亚群的影响[J].成都医学院学报，2017，12（6）：727-731，735.

[7] 侯传伟，郑黎明，赵雷，等.艾迪注射液联合5-氟尿嘧啶对原发性肝癌患者T淋巴细胞亚群的影响[J].实用癌症杂志，2017，32（11）：1851-1854.

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[10] 闫亚南，王宁，王卓昱，等.直接灸“肝俞”对原发性肝癌癌前病变大鼠T淋巴细胞亚群的影响[J].针刺研究，2016，41（4）：321-326.

（收稿日期：2018-08-09）