5种伞形科植物提取物对斜纹夜蛾的生物活性

摘要：以蛇床子不同溶剂提取物为阳性对照，利用浸渍叶碟法测定白芷、防风、独活及胡萝卜籽等几种伞形科植物不同溶剂提取物对3龄斜纹夜蛾幼虫的生物活性。结果表明，5种植物提取物对斜纹夜蛾均有一定的拒食活性；胡萝卜籽石油醚提取物和乙酸乙酯提取物、防风石油醚提取物和乙酸乙酯提取物分别处理 48 h 后，斜纹夜蛾幼虫拒食率相对较高，分别为92.40%和81.27%、82.27%和77.49%；独活乙酸乙酯提取物及胡萝卜籽甲醇提取物胃毒活性相对较高，校正死亡率为40.00%。

关键词：伞形科；斜纹夜蛾；拒食活性；触杀活性

中图分类号： S433.4 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2014）03-0076-02

近年来，开发天然资源物质，创制新型、高效、低毒杀虫剂倍受人们重视，特别是利用天然植物活性成分作为杀虫剂更是引人注目。目前，已开发了烟碱、苦参碱、鱼藤酮、茵蒿素、黎芦碱、茶皂素、川楝素、印楝素、蛇床子素等十几种植物源杀虫剂，在防治多种害虫方面表现出良好的效果[2-4]。蛇床子素为近年来由江苏省农业科学院开发的植物源农药，来源于伞形科植物蛇床子中，已有文献报道蛇床子提取物具有杀虫活性[5]。本试验以蛇床子不同溶剂提取物为阳性对照，测定了白芷、防风、独活和胡萝卜籽等4种伞形科植物不同溶剂提取物对斜纹夜蛾的活性，为伞形科植物作为植物源农药在有害生物治理中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 供试材料

1.1.1 供试虫源 将田间采集的斜纹夜蛾带回室内，用未施药、新鲜干净的甘蓝叶继代饲养、稳定繁殖，挑选健壮、大小一致的3龄幼虫用于生物活性测定。

1.1.2 供试中药材 蛇床子、白芷、防风、独活饮片均购于安徽省亳州市中药材市场，由亳州市中药饮片厂生产；胡萝卜种子“大禹特级三红（五寸参）”由河北大禹种业有限公司生产。供试植物产地或来源、使用部位等信息见表1。

1.2 试验方法

1.2.1 样品制备 将各供试植物材料在40 ℃烘箱内烘干，取出，用粉碎机充分粉碎，制成干粉；分别称取500 g干粉，用95%乙醇热回流提取3次，回收溶剂的浸膏；浸膏用水溶解后，先用石油醚萃取至颜色较淡，再用乙酸乙酯萃取至颜色较浅，剩余部分用甲醇溶解；将石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液及甲醇提取液分别回收，溶剂用丙酮溶解后再用水稀释，同时加入几滴吐温80作乳化剂，稀释成一定浓度的溶液作为供试样品备用。

1.2.2 采用浸渍叶碟法进行活性测定[6] 将新鲜甘蓝叶片剪成20 mm×20 mm的叶碟，放入供试样品内浸2～3 s，取出晾干，放入置有保湿滤纸的培养皿中，每个培养皿中放2片处理叶碟，接入斜纹夜蛾3龄幼虫，将培养皿放入（25±1）℃、光/暗周期为14 h/10 h的养虫笼内进行培养。每处理重复3次，每重复10头幼虫，以少量丙酮加水处理为对照，于48 h后用坐标纸测量取食叶面积，利用SAS专业统计软件计算平均取食面积、拒食率及死亡率。试虫死亡标准：虫体失水皱缩，触之不动。计算方法：拒食率=（对照组取食面积-处理组取食面积）/对照组取食面积×100%；死亡率=死亡虫数/供试总虫数×100%；校正死亡率=（处理组死亡率-对照组死亡率）/（1-对照组死亡率）×100%。

2 结果与分析

由表2可见，白芷、防风、独活等5种伞形科植物提取物，对斜纹夜蛾3龄幼虫均有一定的拒食效果；在提取物浓度 20 g/L 处理48 h后，阳性对照品蛇床子的拒食效果最好；5种伞形科植物提取物拒食活性大小排序为：蛇床子乙酸乙酯提取物（100%）>蛇床子石油醚提取物（99.10%）>胡萝卜籽石油醚提取物（92.40%）>防风石油醚提取物（82.27%）> 胡萝卜籽乙酸乙酯提取物（81.27%）>防风乙酸乙酯提取物（77.49%）>白芷石油醚提取物（75.08%）>独活石油醚提取物（71.23%）>防风甲醇提取物（70.47%）>独活乙酸乙酯提取物（68.50%）>白芷乙酸乙酯提取物（36.03%）>胡萝卜籽甲醇提取物（30.98%）>独活甲醇提取物（1986%）>白芷甲醇提取物（14.76%）>蛇床子甲醇提取物（11.63%）。

比较5种植物提取物对3龄斜纹夜蛾幼虫的胃毒活性，结果表明，在20 g/L处理浓度下，5种植物提取物对斜纹夜蛾的毒杀活性都不是很强，相比阳性对照品蛇床子，独活乙酸乙酯提取物及胡萝卜籽甲醇提取物毒杀活性相对较高，校正死亡率为40.00%。

3 小结与讨论

白芷、防风、独活等5种伞形科植物提取物对斜纹夜蛾3龄幼虫均有一定的拒食效果。胡萝卜籽石油醚提取物和乙酸乙酯提取物、防风石油醚提取物和乙酸乙酯提取物拒食率相对较高，分别为92.40%和81.27%、82.27%和77.49%。供试植物石油醚提取物拒食活性强，可能与大多数中药材都有一定气味有关，也有可能与环境因素有关，具体原因有待进一步研究。供试植物乙酸乙酯提取物较甲醇提取物拒食活性强，部分植物还具有一定的胃毒作用，这是因为乙酸乙酯提取物可能含有香豆素化合物[7-9]。香豆素化合物对昆虫具有拒食和触杀作用，作为一大类植物次生代谢产物在农业上有着广泛的应用，包括对植物的生长调节作用、作为植保素对病原微生物（细菌、病毒等）的作用等[10]，如香豆素、蛇床子素已经开发为杀虫型、杀菌型植物源农药。

白芷、防风、独活等5种伞形科植物提取物对斜纹夜蛾3龄幼虫的胃毒作用不是很好，独活乙酸乙酯提取物及胡萝卜籽甲醇提取物毒杀活性较高，校正死亡率为40.00%，与浓度为500 g/L的蛇床子丙酮、乙酸乙酯、氯仿、石油醚提取液处理菜青虫3龄幼虫24 h，校正死亡率分别为95%、90%、60%、55%[5]相比，死亡率偏小，这可能是因为本试验提取物浓度为20 g/L，试验浓度相对较低，活性成分发挥作用不明显，另外也有可能与斜纹夜蛾的耐药性较强有关。

白芷、独活、防风和胡萝卜籽不仅具有药用价值，对农业害虫也具有拒食活性和杀虫活性，可作为植物源农药资源进行利用。有关这5种伞形科植物杀虫作用、生物活性物质有效成分分析及作用机理等有待进一步研究。

参考文献：

[1]周 真，訾 婷，李丽春，等. 不同种类杀虫剂防治斜纹夜蛾药效试验初报[J]. 农药，2010，49（4）：293-294.

[2]罗万春，慕立义，李云寿. 植物源生物碱的杀虫作用[J]. 农药，1997，36（7）：8-12.

[3]张 兴，杨崇珍，王兴林. 西北地区杀虫植物的筛选[J]. 西北农业大学学报，1999，27（2）：21-27.

[4]郝乃斌，戈巧英. 中国植物源杀虫剂的研制与应用[J]. 植物学通报，1999，16（5）：495-503.

[5]侯奕充，王 超，王国夫 .蛇床子提取液的杀虫活性研究[J]. 湖北农业科学，2012，51（8）：1589-1590.

[6]纪明山，范艳菊，祁之秋，等. 30种中药材提取物对小菜蛾生物活性测定[J]. 江苏农业科学，2010（2）：115-116.

[7]卢 嘉，金 丽，金永生，等. 中药杭白芷化学成分的研究[J]. 第二军医大学学报，2007，28（3）：294-298.

[8]赵 博，杨鑫宝，杨秀伟，等. 防风化学成分的研究[J]. 中国中药杂志，2010，35（12）：1569-1572.

[9]张才煜，张本刚，杨秀伟. 独活化学成分的研究[J]. 解放军药学学报，2007，23（4）：241-245.

[10]朱述钧，王春梅，沈寿国，等. 香豆素类化合物在农业上的应用[J]. 江西农业学报，2006，18（2）：97-100.