生物菌剂防治大樱桃根癌病田间药效试验报告

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摘要：为明确生物菌剂（ZZ-11）对大樱桃根癌病的田间防治效果、在大樱桃上适宜的使用剂量及对作物的影响，进行了本次试验。从综合效果来看，菌剂配合腐殖酸肥料与农药渗剂使用效果好，对根癌病具有治疗效果。菌剂使用浓度为商品制剂稀释200倍液，配合腐殖酸肥500倍液，及农药增渗剂1000～1500倍液冲施使用，用药液10～15kg/株。

关键词：大樱桃根癌病;生物菌剂;治疗作用

中图分类号：S-3

文献标识码：A

DOI：10.19754/j.nyyjs.20191215007

根癌病是一种土传病害，是由根癌土壤杆菌（Agrobacterium fumefaciens）侵染引起[1]，是栽培大樱桃的主要病害之一，几乎所有大樱桃砧木均有不同程度的发生[2]。致病菌为根癌土壤杆菌，主要影响植物细胞分裂，使细胞分裂失控，过度生长，形成根瘤。植物一旦染病，很难治愈，轻则衰弱黄叶，重则死树。樱桃根癌病已成为樱桃高产稳产的严重影响因素[3，4]。

樱桃是山东泰安地区的主栽果树之一，根癌病对其生长造成严重的影响，部分苗圃的发病率接近100%[5，6]。植物根癌病的特殊致病机制主要是由于T-DNA 的转入植物体，造成细胞的无限增值，形成肿瘤。目前对根癌病还没有良好的化学防治手段[7]，使用最多的仍然是最早应用于根癌病的生防细菌K84，其防治根癌病的机理是抢先占领果树伤口位点，在伤口上定殖并产生农杆菌素，阻止其它病菌从伤口侵入，因此其作用是预防而不是治疗，一旦植物罹患根癌病，K84的治疗效果则表现较差[8]。

利用微生物及其代谢产物防治病虫害是常见的生物防治手段[9]。生物菌剂ZZ-11主要成分为枯草芽孢杆菌及其代谢产物。枯草芽孢杆菌是目前应用广泛的益生菌， 其对环境友好、对粮食安全、对人体及动植物无危害，被广泛应用于动物饲料、净化水质、医药和植物[10]。枯草芽孢杆菌是一种革兰氏阳性菌， 菌体杆状，不含内毒素，嗜热、好氧会产芽孢，易分离培养，并能产生多种抗菌素和酶，具有抗菌谱广、活性强和抗逆能力极强的特点[11]。枯草芽孢杆菌应用于植物病害生物防治的研究已经有多年的历史，目前在黄瓜、辣椒、水稻、小麦、玉米等农作物病害上显出较好的防治效果[12]。近1个世纪来，从枯草芽孢杆菌代谢产物中分离纯化出多种抗生物质，并明确了一部分抗生物质的组成、结构和生防作用，为枯草芽孢杆菌在植病生防领域的应用奠定了基础，提供了可行性依据。

枯草芽孢杆菌可以产生环状、线状和分支环状的3种抗菌多肽，对多种植物病原细菌，如水稻纹枯病菌、稻瘟病菌、番茄青枯病等均有强烈抑制作用[13]，但是对大樱桃根癌病的防治效果未见报道。为明确枯草芽孢杆菌对大樱桃根癌病的田间防治效果、在大樱桃上适宜的使用剂量及对作物的安全性，进行了田间药效试验。

1材料与方法

1.1试验对象

试验对象：大樱桃根癌病。

试验田设在山东省泰安市岱岳区崅峪镇南崅峪村樱桃园中（N36°，E117°，海拔171m）。试验地土质棕壤，有机质含量1.32%，碱解氮73mg/kg，pH值6.5，地力均匀。供试大樱桃为四至五年生嫁接苗，株行距4m×4 m，品种为美早、先锋、黄蜜、萨米脱，砧木为考特。共选试验株120株。

1.2试验设计和安排

1.2.1供试药剂

供试剂药剂为枯草芽孢杆菌及其代谢产物（ZZ-11），泰安市树青有机农业科技有限公司提供;对照药剂为0.3%梧宁霉素水剂（辽宁微科生物工程股份有司），市场购得;农药助剂（神展），腐殖酸肥（农家美），均由泰安市树青有机农业科技有限公司提供。

1.2.2试验设计和安排

试验设5个处理：处理1：ZZ-11悬浮剂200倍液;处理2：ZM-11悬浮剂200倍液+侬悦1500倍液;处理3：ZZ-11悬浮剂200倍液+农家美500倍液+侬悦1500倍液;处理4：梧宁霉素200倍液（CK1）+侬悦1500倍液;处理5：清水（CK2）。

每处理4次重复，计20个小区，每6株为1个小区，随机排列。

试验共施药2次，施药时间分别为2018年 4月18日、 5月4日。第1次施药为4月18日，大樱桃处于果实膨大期;隔2周再用药1次。试验期间，无恶劣气候因素影响，适宜试验进行。

按表1试验设计要求，各处理药剂兑水稀释后灌根。挖开根癌病植株根部周围土壤，露出根瘤，将药剂从根部浇下，浸过根瘤，待药液完全渗入土壤后在覆土。每株用药液15kg。

1.3调查方法

整个试验调查2次，第1次调查是在第1次药后14d（2018年5月4日），每株选东、西、南、北、中 5 个方位进行叶片和新梢的测定，在营养枝上从基部起采集第 6～8 片叶片，实验室测定叶绿素含量，并用卷尺测定新梢长度;第2次调查是在第2次药后14d（5月18日），挖土深15～20cm，主要调查根瘤一侧新根生长状况，以及1mm 粗根的数量，2mm 粗根的数量，根瘤有无松动脱落情况。同时观察各用药区有无植物生长异常现象，及对作物产量有无影响。试验数据采用邓肯氏新复极差（DMRT）法进行分析和显著性测定。

2结果与分析

2.1对大樱桃根癌病的影响

从表2看到，处理1、处理2、处理3、处理4新梢生长长度均比对照要好，4个处理差异显著性不大，但是处理2、处理3对处理1、处理4、清水对照差异显著。处理1、处理2、处理3叶绿素含量分别为3.11mg/kg、3.25mg/kg、3.54mg/kg，三者之間差异不显著，但是显著高于处理4叶绿素含量 2.22mg/kg及对照2.45mg/kg。可见供试药剂可以增加植物叶绿素含量，提高植物光合速率，并且与氨基酸肥配合使用可以促进植物新梢生长。

处理3数据显示1mm及2mm粗根数要显著多于其它处理，处理1和处理2之间 1mm粗根数相差不大，但是也多于处理4与处理5。

根瘤病的发病机理是根瘤土壤杆菌首先附着在创伤部位的细胞壁上，有致病力的及若干无致病力的土壤杆菌，互相竞争植物细胞表面上数量有限的附着位点，竞争中，如果无致病力的土壤杆菌先于有致病力的土壤杆菌抢先占据伤口位点，就不会形成肿瘤，反之则会形成肿瘤。K84 菌株防治根瘤病的機理就是由于它抢先占领了果树伤口位点，在其上定植并产生农杆菌素，阻止其它病菌从伤口侵入。根据这一发病机理推测，生物菌剂在防治樱桃根瘤病方面，应该有效果。从表2 可以看到，2次药后，用菌剂处理过的处理1、处理2、处理3表现出根瘤内部变褐，一些小型根瘤（直径约2～3cm以内）松动脱落的现象。可见供试菌剂对抑制根瘤生长具有较好的作用。这与烟台农科院李淑平等的研究结果生物菌肥能有效降低根癌病的发生结果类似[14]。

2.2产品的产量和质量

因为春季遭遇低温冰冻，正值大樱桃花期，导致大樱桃当年绝产，课题组无法采集菌剂对大樱桃产量与品质影响的数据。但是菌剂能够提高植物叶片中叶绿素的含量，从理论推测，供试药剂能够提高大樱桃的产量。

3结论

通过本试验表明，生物菌剂ZZ-11对大樱桃根癌病具有较好的治疗效果。从综合效果来看，菌剂配合使用腐殖酸肥肥料与农药渗剂，效果更好。菌剂使用浓度为商品制剂稀释200倍液，配合农家美500倍液，农药增透剂1000～1500倍液使用。

参考文献

[1] 李淑平，张福兴，孙庆田，等.樱桃根癌病研究进展[J].烟台果树，2010（2）：79.

[2]李霞.果树根癌病生物防治研究进展[J].大连民族学院学报，2007（5）：33-35.

[3]王慧敏.植物根癌病的发生特点与防治对策[J]. 世界农业，2000（7）：28-30.

[4]王慧敏，隋新华，李健强.樱桃根癌土壤杆菌及其对土壤杆菌素K84敏感性的研究[J].微生物学报，1998，38（5）：381-385.

[5]魏艳丽.土壤杆菌K1026对樱桃冠瘿病病原菌的抑制作用及田间防治效果[J].植物保护，2017，43（5）：52-56.

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[7]李淑平，张鹏刚.剖析樱桃三大病害—根癌、根颈腐烂、流胶[J].烟台果树，2017（2）：27-30.

[8]冯瑛.樱桃冠瘿病病原分离鉴定及药剂防治[M].西北农林科技大学，2013：4.

[9]张丽，孙书娥. 利用微生物防治植物病害研究进展[J].农药研究与应用，2010，14（6）：10-13.

[10]闫杨，刘月静，陈芳.枯草芽孢杆菌的应用现状概述[J].生物学教学，2019，44（02）：2-3.

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[12]穆常青，朱昌雄.枯草芽孢杆菌代谢物质的研究进展及其在植病生防中的应用[J]. 中国生物防治学报，2006，22（10）：179-184.

[13]赵新林，赵思峰.枯草芽孢杆菌对植物病害生物防治的作用机理[J].湖北农业科学，2011 （15）：3025-3028.

[14]李淑平，张福兴.樱桃根癌病防治试验[J]. 烟台果树，2013（2）：7-9.

作者简介：

马雪莉（1975-），女，硕士，讲师。研究方向：杀菌剂应用研究及植物保护教学与实践。