宫颈癌及癌前病变液基细胞学与组织学对比分析以及CK17、Ki67、P16激素受体测定的临床意义

【摘要】 目的：观察宫颈癌及癌前病变液基细胞学（TCT）与组织学诊断符合情况以及相关激素受体表达的临床意义。方法：将本院2011年10月-2012年10月间门诊及住院患者进行的TCT检测病例，经术后病理组织学检查确诊患者216例，从诊断符合情况，病变的病理类型，激素受体表达情况等方面进行对比分析。结果：两种方法检测到宫颈癌及癌前病变的符合率较高，对应激素受体表达有显著差异性。结论：宫颈癌及癌前病变的液基细胞学与组织学病理诊断，符合率达96.8%。恶性病变中鳞形细胞癌居多占96.4%。激素受体中Ki67、P16，在宫颈癌及癌前病变中，随着恶性程度增高，阳性表达明显增加，其预后相对较差，而CK17正好相反。

【关键词】 宫颈癌及癌前病变； 液基细胞学； 组织学； 激素受体

子宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一。发病年龄以40～60岁居多[1]，宫颈癌及癌前病变TCT检查，是一种简便、快速、安全、准确和创伤性极小的诊断技术，TCT技术在妇科检查中已广泛应用，它是一个有效筛查发现肿瘤细胞的常规方法[2]，现将笔者所在医院TCT检查见异形细胞，后进行组织学活检的216例患者作对比分析，以求得到认识上的提高，并作为患者预后及指导临床治疗的可靠指标。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集笔者所在科2011年10月-2012年10月间门诊“两癌筛查”及住院患者进行的TCT检查病例2842例，经术后病理组织学检查确诊患者216例，恶性病变28例，其中宫颈原位癌21例，浸润癌7例，上皮内高度病变148例，其中中度不典型增生（CIN2级）124例，重度不典型增生（CIN3级）24例，上皮内低度病变（CIN1级）40例，年龄32～66岁，中位年龄43岁，216例患者均作CK17、Ki67、P16激素受体测定。

1.2 方法 用AGQ-20一次性塑料毛刷宫颈取样器采集宫颈及阴道脱落细胞，放入ABY细胞专用保存液中，经常规处理制片，95%乙醇固定，巴氏法染色，免疫组化采用SP法染色，PH6.0柠檬酸缓冲液高压修复，DAB显色，试剂CK17、Ki67、P16均由福州迈新生物技术开发有限公司提供。

1.3 结果判定 自1988年美国细胞协会提出TBS（The Beseheda System）细胞学分类诊断后，1991年和2001年又分别做了两次修订[3]，提出宫颈上皮细胞异常是TBS对宫颈细胞等异常改变的一个总称，包括鳞状上皮和腺上皮异常，鳞状上皮异常又分为：（1）非典型鳞状上皮细胞，包括不能明确意义的（ASC-US）和倾向于上皮内高度病变（ASC-H）。（2）低级别鳞状上皮内病变（LSIL），包括CIN1级和HPV感染细胞学的改变。（3）高级别鳞状上皮内病史（HSIL），相当于CIN2级，CIN3级，或鳞状上皮中度，重度异型增生及原位癌的细胞学改变。（4）鳞状细胞癌（SCC）。腺上皮异常包括非典型腺细胞（AGC）炎性所致和倾向于肿瘤，腺癌。免疫组化参照文献[4]，CK17表达以细胞质棕黄色为阳性，P16表达以细胞核棕黄色为主，Ki67阳性表达定位于细胞核，将阳性的细胞数量和强度分为4级，染色强度与背景无明显差别为（-），阳性细胞数≤10%，染色强度大部分较弱为（±），阳性细胞数>50%，染色强度为中至强染色者为（+++），介于两者之间为（++）。

1.4 统计学处理 采用SPSS 10.0软件进行Speaman等级资料的相关性分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 TCT结果 2842例TCT检查病例中，有病理组织学诊断对照216例正确率96.8%（209/216），TCT诊断恶性肿瘤，组织活检对比正确率为100%（28/28），其中宫颈原位癌占75.0%（21/28），浸润癌占25.0%（7/28），包括鳞形细胞癌96.4%（27/28）为子宫颈癌中最常见的类型，与文献[5]报道一致，腺癌3.6%（1/28），上皮内高度病变68.5%（148/216），其中CIN2级83.8%（124/148），CIN3级16.2%（24/148），上皮内低度病变CIN1级18.5%（40/216），年龄32～66岁，中位年龄43岁，216例患者均作CK17、Ki67、P16激素受体测定。

2.2 免疫组化结果 CK17在宫颈不成熟鳞状上皮化生中（IM）阳性表达率近乎100%，明显高于LSIL和HSIL（10%和15%），显示CK17在宫颈IM和CIN病变中的阳性表达差异极显著（P<0.01），Ki67在正常宫颈鳞状上皮基底细胞核中为弱阳性（±），在宫颈IM和CIN病变中，从IM到CIN病变各级别中，其阳性表达率逐渐增强且差异极显著（P<0.01），P16在少量IM中可见弱阳性（±），而在CIN病变各级别中阳性表达明显增加，呈胞核/胞质全层强阳性（+++），显示P16在宫颈IM和CIN中阳性表达差异极显著，（P<0.01）。

3 讨论

3.1 TCT特点 采用膜式离心制片技术，应用梯度分层的细胞保存液，可有效地分离黏液与血液，锥式离心保存杯，能有效地采集全部细胞标本，特种封膜支架可均匀地筛铺有效细胞，涂片细胞多，异型性明显，成群的细胞大小悬殊，成鱼鳞状排列，核仁明显，清晰，便于识别。

3.2 TCT的临床应用 TCT是检查宫颈癌及癌前病变的一种重要的诊断方法，笔者所在科开展TCT多年，体会TCT是诊断宫颈癌及癌前病变的简便、快速、安全，准确率较高，损伤性极小的诊断技术与传统的巴氏涂片检查相比，明显提高了满意度及宫颈异常细胞的检出率，病理医师经与常规病理切片进行对照，观察更有利于提高TCT的诊断水平。

3.3 CK17，Ki67，P16与宫颈癌及癌前病变的关系 （1）CK17在胞质中表达明显，伴随宫颈鳞状上皮细胞的分化成熟度增加，CK17阳性着色呈现递减趋势，如宫颈鳞状上皮细胞分化成熟后，CK17阳性仅限于基底层细胞，而在CIN中，CK17表达于间变细胞下的基底层细胞，大部分间变细胞呈阴性（-）或弱阳性（±）。由此说明，宫颈鳞状上皮细胞分化越成熟，CK17阳性表达率越高，患者预后越好。（2）Ki67在正常宫颈鳞状上皮基底细胞核中呈阴性（-）或弱阳性（±）表达，而在CIN病变中随着级别增高，其阳性表达率逐渐增强，在宫颈癌中Ki67呈高度强阳性表达，提示患者恶性越明显，预后较差，P16以胞核棕黄色为（±），P16在不成熟鳞状上皮化生和其他非肿瘤性宫颈上皮中均为阴性，而在CIN病变中随着级别增加，阳性表达明显增加，呈胞核/胞质全层阳性，也提示患者宫颈上皮细胞分化不成熟明显，恶性越明显，其预后较差。（3）宫颈鳞状上皮CK17阳性率越高，患者癌变率越低，而Ki67，P16阳性率越高，其癌变率越高，故宫颈癌及癌前病变患者应常规检测CK17、Ki67，P16这对病理诊断分级，预测预后，指导临床治疗及提高生存质量具有重要临床意义和实用价值，值得普遍推广。

3.4 宫颈癌及癌前病变的治疗 目前宫颈癌通用的治疗方法是根据患者对保留子宫的愿望，分别采用冷刀宫颈锥切术或全子宫切除术[6]，对于不满意阴道镜检查和病灶位于子宫颈管部位较深的患者，采用冷刀锥切术是杜绝漏诊的最好办法[7]，对宫颈锥切患者具有诊断和治疗宫颈上皮内病变的双重作用，可以早期发现微小浸润癌，并准确了解其深度及宽度。有学者认为宫颈冷刀锥切保留了切除标本的组织评价价值，可以最大限度避免遗漏浸润癌，对手术的彻底性有准确的评估[8-9]。

参考文献

[1] 李玉林.病理学[M].北京：人民卫生出版社，2004：297.

[2] 丁华野，周晓军.使用液基细胞制片机的体会[J].诊断病理学杂志，2011，18（6）：431.

[3] 黄受方.新版《子宫颈细胞学Bethesda报告系统》读后感[J].诊断病理学杂志，2005，12（3）：161-163.

[4] 丁华野，周晓军.CK17和P16在宫颈鳞状上皮不成熟化生和宫颈上皮内瘤变中的表达及意义[J].诊断病理学杂志，2009，16（3）：174-176.

[5] 田杨顺.妇科肿瘤临床病理学[M].北京：人民卫生出版社，2001：101.

[6] 卜淑娜.宫颈上皮内瘤变43例手术前后病理分析[J].北京医学，2012，34（10）：939.

[7] 李晴，李卫红.子宫颈锥形切除术病理结果分析[J].中国肿瘤临床，2005，32（3）：687.

[8] 孟庆伟，毛莹.冷刀锥切切缘阴性的重度上皮内病变患者的预后分析[J].中华妇产科杂志，2007，42（1）：457.

[9] 赖炜玲，李瑞芳，杨改珍.98例宫颈癌的细胞学结果分析[J].中国医学创新，2012，9（27）：72-73.

（收稿日期：2012-12-22） （本文编辑：李静）